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            小鼠(Hyp)ELISA試劑盒免費代測

            發布時間:2022-08-25瀏覽:41次

            檢測范圍:                                                           

            1μg/L -40μg/L

             

            使用目的:

            本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中(Hyp)含量

            實驗原理

            本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本小鼠羥(Hyp)水平。用純化的小鼠羥(Hyp)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入(Hyp)再與HRP標記的(Hyp)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的(Hyp)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品小鼠(Hyp)濃度。

            試劑盒組成

            1

            30倍濃縮洗滌液

            20ml×1

            7

            終止液

            6ml×1

            2

            酶標試劑

            6ml×1

            8

            標準品(80μg/L

            0.5ml×1

            3

            標包被

            12孔×8

            9

            標準品稀釋液

            1.5ml×1

            4

            樣品稀釋液

            6ml×1

            10

            說明書

            1

            5

            顯色劑A

            6ml×1

            11

            封板膜

            2張  

            6

            顯色劑B

            6ml×1/

            12

            密封袋

            1

            標本要求 

            1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但避免反復凍融

            2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

            操作步驟

            1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

            40μg/L

            5號標準品

            150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

            20μg/L

            4號標準品

            150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋液

            10μg/L

            3號標準品

            150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋液

            5μg/L

            2號標準品

            150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋液

            2.5μg/L

            1號標準品

            150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋液

            2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻

            3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘   

            4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

            5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

            6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外

            7. 溫育:操作同3

            8. 洗滌:操作同5

            9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.

            10. 終止:每孔加終止50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)

            11. 測定:以空白孔調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。


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